技術(shù)文獻(xiàn)
技術(shù)文獻(xiàn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗胰蛋白酶(AT)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗心肌抗體(AMA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗線粒體ADP/ATP載體(AAC)抗體elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(IgM)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗人生長(zhǎng)激素抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)elisa檢測(cè)試劑盒