技術(shù)文獻(xiàn)
技術(shù)文獻(xiàn)
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到
100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)重組蛋白
過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白
過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)重組蛋白
過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)重組蛋白
含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)重組蛋白
含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白
含動力蛋白重鏈域蛋白1(DNHD1)重組蛋白
含卷曲螺旋域蛋白3(CCDC3)重組蛋白
含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)重組蛋白
核糖核酸酶A10(RNASE10)重組蛋白
核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白
核糖體蛋白L23A(RPL23A)重組蛋白
核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)重組蛋白
核因子κB受體激活因子配基(RANκL)重組蛋白
黑色素瘤關(guān)聯(lián)硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)重組蛋白
紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)重組蛋白
紅細(xì)胞生成素(EPO)重組蛋白
紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白
花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白
滑行蛋白α(TXLNα)重組蛋白
踝蛋白(TLN)重組蛋白
環(huán)加氧酶1(PTGS1)重組蛋白