技術文獻
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測定法的靈敏度來自作為報告的酶。眾所周知,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
磷酸化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體
磷酸化BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體
磷酸化B-Raf抗體
磷酸化B-Raf抗體
磷酸化Bcl-xL蛋白抗體
高表達神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體
B細胞遷移基因4抗體
BCL2相互作用蛋白質抗體
大腦蛋白2抗體
B細胞轉錄激活因子抗體
BCL6B抗體
BAP31蛋白抗體
支鏈氨基酸轉氨酶2抗體
BCL2相關蛋白A1抗體
B細胞淋巴瘤蛋白3抗體
轉錄因子MYB相關蛋白B抗體
防御素β1/Defensin β1抗體
B細胞活化因子受體抗體
TNF家族B細胞激活因子抗體
蛇毒巴曲酶抗體
大腦蛋白2抗體
程序性死亡配體1抗體
B7-H4抗體
β分泌酶抗體
相關死亡促進因子Bad抗體